多克隆抗体特点:
1.识别任一抗原上的多个表位,所得血清为异质性抗体混合物,亲和力各有不同
2.主要有IgG亚类组成
3.通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体,尤其是针对高同源性蛋白家族
优劣势:
1. 高亲和性:由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子,多抗可放大低表达水平靶蛋白的信号
2.可识别多个表位,有利于免疫沉淀和染色质免疫沉淀实验获得更好的结果
3.与相似抗原有更多交叉反应,可放大低表达信号,染色背景干扰较高
4.对微小抗原变化的包容性更强,可检测同源性的蛋白家族
单克隆抗体特点:
1. 识别一个抗原上的单一抗原表位
2.仅由一种抗体亚型组成(IgG1、IgG2、IgG3)如需使用二抗进行检测,应针对正确的亚类选择抗体
优劣势:
1.高特异性:单抗适用于实验中的一抗,产生背景染色信号通常显著低于多克隆抗体
2.与多抗相比,同质性较高,结果重现性较高
3.特异性地检测一个靶表位,不易与其它蛋白发生交叉反应,染色背景干扰低
4.检测单一抗原或蛋白质家族的单一成员